Nascido em 5 de março de 1960 em Copacabana, Rio de Janeiro, e criado em São Cristóvão, Thiago Justino começou sua carreira no teatro escolar. Apesar da oposição familiar, trabalhou como office boy e modelou para ajudar nas despesas. Sua carreira na televisão começou com uma breve participação no seriado Plantão de Polícia e se consolidou em novelas como Pacto de Sangue e a minissérie Abolição.

Em Portugal, onde se mudou aos 33 anos devido ao racismo no Brasil, encontrou novas oportunidades como ator, diretor e professor. Lá, fundou uma agência e um grupo de teatro, além de adaptar peças como Conduzindo Miss Daisy. Casou-se com a escritora Alexandra Solnado e teve um filho, Gabriel.

Retornou ao Brasil em 2015 para atuar na novela Rock Story, após trabalhar em Moçambique no filme Comboio de Sal e Açúcar, que foi indicado ao Óscar. Desde então, continua atuando em novelas e filmes no Brasil, em papéis variados.